Métodos de teste de antígeno rápido

Um teste de vírus positivo indica uma infecção atual, enquanto um teste de anticorpo positivo indica uma infecção anterior. Outras técnicas incluem tomografias, verificando a temperatura corporal elevada, verificando níveis baixos de oxigênio no sangue e detecção por cães treinados.

Detecção do vírus

A detecção de vírus é geralmente feita procurando o RNA interno ou fragmentos de proteína do vírus no exterior do vírus. Os testes que procuram antígenos virais (partes do vírus) são chamados Testes de antígeno.

Existem vários tipos de testes que procuram vírus detectando a presença de RNA viral. Esses são chamados de testes nucleicos ou moleculares, após biologia molecular. -PCR) Teste. Outros métodos utilizados nos testes moleculares incluem CRISPR, amplificação isotérmica do ácido nucleico, reação em cadeia da polimerase digital, análise de microarranjos e sequenciamento de próxima geração.

Teste de reação em cadeia da polimerase de transcrição reversa (RT-PCR)

A reação em cadeia da polimerase (PCR) é um processo que amplifica (replica) um pequeno fragmento bem definido de DNA centenas de milhares de vezes, produzindo fragmentos suficientes para análise. As amostras de teste são tratadas com certos produtos químicos, permitindo extrair DNA. A transcrição reversa converte RNA em DNA.

A reação em cadeia da polimerase da transcrição reversa (RT-PCR) usa primeiro transcrição reversa para obter o DNA, que é então amplificado por PCR para gerar DNA suficiente para análise. -O processo de PCR geralmente leva várias horas. Esses testes também são chamados de análises moleculares ou genéticas.A PCR em tempo real (qPCR) oferece vantagens como automação, maior taxa de transferência e instrumentação mais confiável. Tornou -se o método preferido.Essa técnica combinada é descrita como RT-PCR em tempo real ou RT-PCR quantitativa, às vezes abreviada como qrt-pcr rrt-pcr ou rt-qpcr, embora a RT-PCR às vezes seja usada -PCR ou PCR. Experimentos quantitativos de PCR em tempo real (MIQE) propuseram o termo RT-qPCR, mas nem todos os autores aderem a isso.

A sensibilidade média dos testes moleculares rápidos depende da marca. Para ID agora, a sensibilidade média foi de 73,0%e a especificidade média foi de 99,7%; Para o XPERT XPress, a sensibilidade média foi de 100%e a especificidade média foi de 97,2%.

Nos testes de diagnóstico, a sensibilidade é a medida da capacidade do teste de identificar verdadeiros positivos, e a especificidade é a medida da capacidade do teste de identificar verdadeiros negativos. e especificidade, portanto, maior sensibilidade significará menor especificidade e vice -versa.Um teste de especificidade de 90% identificará corretamente 90% das pessoas não infectadas, deixando 10% dos resultados falsos positivos.As amostras podem ser obtidas por uma variedade de métodos, incluindo swabs nasofaríngeos, escarro (material esperado), swabs da garganta, [36] material das vias aéreas profundas coletadas através de um cateter de sucção, ou saliva.drosten et al. Comentando que, para as SARs em 2003, "Do ponto de vista diagnóstico, é importante observar que os swabs nasais e na garganta não parecem ser adequados para o diagnóstico, pois esses materiais contêm muito menos RNA viral do que o escarro e se estes apenas estes , o vírus pode escapar do material de detecção testado.A sensibilidade das amostras clínicas por RT-PCR foi de 63% para swabs nasais, 32% para swabs da garganta, 48% para fezes, 72-75% para escarro e 93-95% para a lavagem broncoalveolar. A probabilidade de detectar o vírus depende do método de coleta e do tempo decorrido desde a infecção. Segundo Drosten, os testes com swabs de garganta são confiáveis ​​apenas para a primeira semana. O vírus pode então deixar a garganta e se multiplicar nos pulmões. Durante a segunda semana, é preferível a coleção de escarro ou via aérea profunda.

A coleção de saliva pode ser tão eficaz quanto os swabs nasais e na garganta, embora isso seja incerto. A amostragem de saliva pode reduzir o risco para os profissionais de saúde, eliminando uma interação física próxima. Também é mais confortável para os pacientes. As pessoas em quarentena podem coletar suas próprias amostras. O valor diagnóstico do teste de saliva depende do local da amostra (garganta profunda, cavidade oral ou glândulas salivares). Alguns estudos descobriram que a saliva tem maior sensibilidade e consistência em comparação com amostras de swab.Em 15 de agosto de 2020, o FDA dos EUA concedeu autorização de uso de emergência a um teste de saliva desenvolvido pela Universidade de Yale que concede resultados em poucas horas.

Em 4 de janeiro de 2021, o US FDA emitiu um aviso sobre o risco de resultados falsos do teste de RT-PCR em tempo real SARS-CoV-2 curativo, especialmente resultados falsos negativos.

As cargas virais medidas nas amostras respiratórias superiores diminuíram após o início dos sintomas. Após a recuperação do outro vírus da replicação competente. Não houve correlação clara entre o comprimento da doença e a duração do derramamento de RNA viral após a recuperação nas amostras respiratórias superiores.

Tipos de testes de anticorpos

Teste de diagnóstico rápido (RDT)

Os RDTs geralmente usam ensaios de fluxo lateral pequenos, portáteis, positivos/negativos que podem ser realizados no ponto de atendimento. Os RDTs podem processar amostras de sangue, amostras de saliva ou swabs nasais. O RDT produz linhas coloridas para indicar resultados positivos ou negativos.Ensaio imunossorvente ligado a enzimas (ELISA),O ELISA pode ser qualitativo ou quantitativo e geralmente requer um laboratório. Esses testes geralmente usam sangue total, plasma ou amostras de soro. As placas são revestidas com proteínas virais, como a proteína SARS-CoV-2. A amostra é incubada com a proteína , permitindo que qualquer anticorpo se liga a ele. Os complexos de anticorpos-proteínas podem então ser detectados com outra lavagem de anticorpos que produz uma leitura de cor/fluorescência.

Teste de neutralização

Os ensaios de neutralização avaliam se um anticorpo de amostra impede a infecção viral em células de teste. Testes esses testes amostras de sangue, plasma ou soro. O teste cultiva células que permitem que o vírus se multiplique (por exemplo, células Vero E6). Ao variar a concentração de anticorpos, os pesquisadores poderiam visualizar e quantificar quanto do anticorpo de teste estava bloqueando a replicação viral.

Imunoensaio quimioluminescente

Os imunoensaios quimioluminescentes são testes de laboratório quantitativos. micropartículas revestidas. Os anticorpos reagem com proteínas virais para formar complexos. Os anticorpos secundários conjugados com senzima são adicionados e ligados a esses complexos. A reação química resultante produz luz. A radioatividade foi usada para calcular o número de anticorpos. O teste pode identificar vários tipos de Anticorpos, incluindo IgG, IgM e IgA.

Outros testes

Teste de Sniff

A perda repentina de olfato pode ser usada para rastrear pessoas para o Covid-19 diariamente. Um estudo dos Institutos Nacionais de Saúde mostrou que as pessoas infectadas com SARS-CoV-2 não conseguiram cheirar uma mistura de 25% de etanol e água. Devido às várias condições que podem causar anosmia, o teste de cheirar não é definitivo, mas sugere a necessidade de um teste de PCR. Porque a anosmia precede outros sintomas, é necessário que os testes extensos do Snift. O fato de serem rápidos, fáceis e capazes de auto-administração diariamente.

Imagem

As características visíveis típicas na TC incluem inicialmente as opacidades bilaterais de vidro fundamental multilobar com distribuição periférica ou posterior. CoVID-19 identificado com mais precisão usando a TC em comparação com a RT-PCR.À medida que a doença progride, podem ocorrer dominância subpleural, pavimentação louca e consolidação. As tomografias e os raios X de tórax não são recomendados para o diagnóstico de Covid-19. Radiológicos achados de Covid-19 não têm especificidade.Raios-X de tórax, tomografia computadorizada e ultrassom são maneiras de detectar a doença do coronavírus.